祖传Co-IP(免疫共沉淀)实验操作全流程,附结果图解读+疑难问题解析 ...
视频学习:免疫共沉淀CoIP-标准流程与常见问题解决方案_(可下载ppt课件) 如果想探索细胞内蛋白质相互作用的奥秘,免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation ,Co-IP)是必备的关键工具。 通过特定抗体的作用,我们可以…
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视频学习:免疫共沉淀CoIP-标准流程与常见问题解决方案_(可下载ppt课件) 如果想探索细胞内蛋白质相互作用的奥秘,免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation ,Co-IP)是必备的关键工具。 通过特定抗体的作用,我们可以…
Aug 18, 2025 · 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,简称Co-IP)是一种基于抗体-抗原的特异性结合以及蛋白质-蛋白质相互组作用的原理来研究蛋白质-蛋白质相互作用的技术,其核心是验证两种或者多种蛋白质是否在细胞内或体外形成物理结合的复合物。
Jul 1, 2024 · 定义 免疫共沉淀技术是一种研究两种蛋白在体内是否存在相互作用的有效方法,通过抗体和已知蛋白结合,从而捕获整个已知蛋白复合物,进而研究复合物中与已知蛋白存在相互作用的蛋白。 用途 蛋白质相互作用:测定两种目标蛋白质是否在体内结合;
2 days ago · 第一种抗体先于蛋白结合,再加入磁珠,第二种抗体先与磁珠孵育,最后加入蛋白,第三种同时加入,一般情况下第一种与第二种相差不大,如果蛋白量过高,比如大于1000ug,建议使用第二种,否则蛋白容易吸附在磁珠上,降低得率。 5、Input组要跑内参吗?
内源性 Co-IP 实验可选择蛋白 A/G 磁珠或蛋白 A/G 琼脂糖;外源性 Co-IP 实验中蛋白携带标签 (如 Flag、HA、c-Myc、GST 等),可以选择标签抗体类磁珠/琼脂糖凝胶珠 (如 Anti-Flag 磁珠、Anti-HA 磁珠、Anti-c-Myc 磁珠、Anti-GST 磁珠等),可一定程度增强丰度,减少 IgG 干扰。
注意事项: 抗体的选择十分重要, 选经过 IP 验证的抗体,可以减少假阳性概率。 同时, 要注意抗体/缓冲液的比例,抗体稀释过度不利于后续抗原抗体结合;而抗体过多就不能完全沉降在固相基质上,残存于上清。
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是研究蛋白质相互作用的常用方法,其基本原理是利用固定在磁珠或琼脂糖珠上的“抗体”对“目标蛋白”进行捕获,并进一步捕获与目标蛋白有相互作用的蛋白。